流式检测

一、细胞凋亡检测
细胞凋亡是细胞主动实施的一种程序性死亡，是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸 （PS） 只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸 （PS） 由脂膜内侧翻向外侧。

实验原理

AnnexinⅤ 是一种分子量为 35-36kD 的 Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的 PS 高亲和力特异性结合。因此 Annexin V 作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将 AnnexinⅤ 进行荧光素 FITC 标记，以标记了的 Annexin V 作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙锭 （Propidium Iodide, PI） 是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜使细胞核染红。因此将Annexin V 与 PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

实验结果

二、细胞周期检测
体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系，如随着分裂指数的不断提高，细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比，它是测定细胞 周期的一个重要指标，也是不同实验研究选择细胞的重要依据。

实验原理

细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期：即 DNA 合成前期（G1期）、DNA 合成期（S期）与 DNA 合成后期（G2期）。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，执行一定生物学功能（G0期）。由于细胞周期各时相的 DNA 含量不同，通常正常细胞的 G1/ G0 期具有二倍体细胞的 DNA 含量（2N），而 G2/ M 期具有四倍体细胞的 DNA 含量（4N），而  S 期的 DNA 含量介于二倍体和四倍体之间。PI 可以与 DNA 结合，其荧光强度直接反映了细胞内 DNA含量。因此，通过流式细胞仪 PI 染色法对细胞内 DNA 含量进行检测时，可以将细胞周期各时相区分为 G1/G0 期，S 期和 G2/M 期。

实验结果

实验室展示